Effects of pisolithus arhizus and other ectomycorrhizal fungi on in vitro rooting of pinus monticoia adventitious shoot.

Abstract

Micropropagation of conifers permits the production of large numbers of selected genotypes but in <i>Pinus monticola</i> as well as several other systems, this process is limited by the difficulty of obtaining roots. The potential of ectomycorrhizal fungi to induce and improve adventitious root formation on in vitro micropropagated shoots was investigated.

Preliminary trials on de·rooted seedlings showed 100% rooting with <i>Laccaria bicolorr, Rhizopogon rubescens</i>and <i>Pisolilhus arhizus</i> while rooting on controls was at 79 %; however only <i>P. arhizus</i> had a significant effect on the rooting of micropropagated shoots.

Co-cultivation with P. arhizus in a medium amended with 0.3 µM 1-naphthaleneacetic acid (NAA) gave the best rooting percentages (57%). Thin layer chromatography, high-performance liquid chromatography, and gas chromatography/mass spectrometric analysis of the broth from a <i>P. arhizus</i> culture in NAA amended media indicated the presence of hydroxylated NAA metabolites.

La multiplication végétative in vitro rend possible la production d'un vaste nombre de génotypes choisis. Cependant, pour le <i>Pinus</i> monticolaet d' autres essences diverses, cette méthode de production se trouve limitée par la difficulté d'obtenir des racines. Les auteurs ont examiné le potenliel des champignons ectomycorhiziens à activer et à améliorer la formation de racines adventives sur des tiges micropropagagées.

Une étude exploratoire à partir de semis deracinés montre qu' il est possible d'obtenir un enracinement de 100% avec Ie Laccaria bicolor, le <i>Rhizopogon</i> rubescens et le <i>Pisolithus arhizus</i>, comparativement à un enracinement de 79% avec les échantillons-témoins. Toutefois, seul le P. arhizus exerce une forte influence sur l'enracinement de tiges micropropagagées. <br>La coculture avec le <i>P. arhizus</i> dans un milieu modifié par de l'acide naphtalène acétique (ANA) à raison de 0,3 µM a donné les meilleurs taux d'enracinement (57 %).

Les analyses par chromatographic sur couche mince, par chromatographie liquide haute performance et par couplage chromatographie en phase gazeuse-spectrométrie de masse, du bouillon de la culture de <i>P. arhizus</i> dans un milieu modifié avec de l' ANA révelènt la présence de metabolites d' ANA hydroxylées.